高中生物难点是哪个(PCR高温解旋,DNA复制方向固定,选择特异性引物至关重要!)

基因工程技术中PCR扩增抗旱基因
引言
在2020年湖北省高三四月线上调研考试的38题中,涉及到利用基因工程技术将甲的抗旱基因转移到乙体内。其中,PCR技术被应用于扩增目的基因,而PCR技术的第一步涉及到目的基因的解螺旋。
PCR技术中的解螺旋
PCR技术的第一步是解螺旋目的基因,与一般的解旋酶不同,这里采用了高温。解螺旋的过程将目的基因的双链DNA分离成两条单链,为后续步骤奠定基础。
DNA解旋后的特异性引物
解旋后,我们知道抗旱基因的两条链的方向是相反的。为了进行PCR扩增,特异性引物需要与模板列进行互补配对。这种互补配对称为退火互补配对,特异性引物的方向与模板列是相反的。
特异性引物的选择
特异性引物的选择至关重要。引物的方向必须与模板列相反,因此在选择引物时,必须确保其能够与模板列进行互补配对。在这个题目中,模板列上面的序列是三一撇到五一撇,下面的序列是补一撇到3A撇。因此,只有B和C才能作为引物。
DNA聚合酶的延伸
通过特异性引物的作用,由耐高温的DNA聚合酶进行延伸。DNA聚合酶只能沿着五一撇到三一撇的方向进行延伸,符合DNA复制的特点。这一步是PCR扩增的关键步骤,确保新的DNA链的合成。
总结
综上所述,利用PCR技术扩增抗旱基因是基因工程技术中的重要步骤。通过高温解螺旋、特异性引物的选择以及DNA聚合酶的延伸,成功实现了目的基因的扩增。这一过程在基因工程领域具有广泛的应用,为研究和应用特定基因提供了有力的工具。
